Στην Κρήτη, η ποιότητα των παικτών του Εθνικού Αστέρα ήταν αρκετή για να κάνει την διαφορά κόντρα στον Ατσαλένιο. Η ομάδα της Καισαριανής, παρά τις απουσίες που αντιμετώπιζε για διάφορους λόγους, επικράτησε άνετα 4-1 κερδίζοντας το εισιτήριο για την επόμενη φάση.
Θετικό ήταν το νέο ξεκίνημα του ΟΦΗ στις επίσημες υποχρεώσεις, αφού επικράτησε 2-0 της Αναγέννησης Γιαννιτσών. Οι παίκτες του Μύρων Σηφάκη έστειλαν αισιόδοξα μηνύματα με την απόδοση τους για την συνέχεια της σεζόν.

Ο Χρήστος Χατζηπαντελίδης, έκανε την διαφορά στην πρόκριση του Θρασύβουλου επί του Πλατανιά με 3-2. Η είσοδος του στον αγώνα αποδείχτηκε "χρυσή" για τον Νίκο Κεχαγιά, καθώς με δύο γκολ σε διάστημα 5 λεπτών, ανέτρεψε το εις βάρος σκορ για τον Θρασύβουλο.

Ο Ιωνικός με κορυφαίο τον Λανγκλέ επικράτησε της νεοφώτιστης στην Γ΄Εθνική Δόξα Κρανούλας με 3-1. Οι γηπεδούχοι προέβαλαν αντίσταση στους Νικαιώτες, δίχως, ωστόσο, να καταφέρουν την έκπληξη.

Ο Βιδάλης ήταν ο λυτρωτής για τον Εθνικό. Με δικό του γκολ στην παράταση 115', οι "κυανόλευκοι" έκαμψαν την αντίσταση του Σαρωνικού.

Στην διαδικασία των πέναλτι ο Αγροτικός Αστέρας πήρε την πρόκριση στην επόμενη φάση του κυπέλλου Ελλάδας, επί του Οδυσσέα Αναγέννησης.

Σαρωνικός – Εθνικός 0-1
(115' Βιδάλης)
Δόξα Κρανούλας – Ιωνικός 1-3
(11' Λαζαρίδης – 18' Γιόνδης, 78' Μακράκης, 91' Λανγκλέ)
ΠΑΟΝΕ – Ηλιούπολη 1-0

(17' Ασλανίδης)
Ατσαλένιος – Εθνικός Αστέρας 1-4
(94' Καραδέμητρος - 4' Φαμπίνιο, 36' Ουκάρ, 58' Xωριανόπουλος, 79' Πασάς)
Αναγέννηση Γιαννιτσών – ΟΦΗ 0-2
(30', 83' Μανούσος)
Πλατανιάς – Θρασύβουλος 2-3
(12' Πάγκαλος, 20' Δράκος – 8' Σαπάνης, 72', 76' Χατζηπαντελίδης)
Οδυσσέας Αναγέννησης – Αγροτικός Αστέρας (2-2 παρ.) (3-4πεν.)
(42' Σαμουηλίδης, 84' Γαϊδαρτζής – 34', 79'(πεν.) Μπεκιάρης)

ΑΟ Τρίκαλα – Αναγέννηση Καρδίτσας 1-0


Ασπρόπυργος - Διαγόρας 1-1 (5-3 πεν.)


Μακεδονικός - Πανσερραϊκός 0-1

Bέροια – Παναιτωλικός 0-2

ΠΑΣ Κόρινθος - Καλαμάτα 2-3

ΠΕΜΠΤΗ 03/09/2009
16:45 Εορδαϊκός 2007-Δόξα Δράμας
16:45 Αναγέννηση Επανωμής-Πιερικός
19:00 Παναχαϊκή 2005-Aιγάλεω